自2013年CLARITY組織透明化方法誕生以來,完整生物大組織的透明、熒光標記和三維成像已成為生命科學領域一個熱門的議題。許多科研工作者致力于探索和改進各種透明化方法:如3DISCO(2012)、iDISCO(2014)、PEGASOS(2018)等油性透明化方法,SeeDB(2013)、CUBIC(2014)、UbasM(2017)等水性透明化方法,PACT(2014)、SWITCH(2015)、SHIELD(2018)等基于水凝膠的透明化方法,以期獲得一套全組織高分辨率(至少細胞級分辨率)成像的解決方案,專門用于探索神經(jīng)、血管等大尺度結(jié)構(gòu)在完整腦、心、肝、脾、肺、腎、骨骼中的3D準定位和測量。
組織透明化已經(jīng)成為一種較為強大的技術,越來越多的實驗室開始選擇將其引入具體的科研項目中。由于有眾多文獻可供參考,因此前期的組織透明化可以從試劑原料選擇到操作細節(jié)步驟都是有據(jù)可循,但是到透明化匹配階段,卻舉步維艱:樣本需要再繼續(xù)透嗎?這種狀態(tài)樣本透好了嗎?透好的樣本到底該是怎樣的?

圖示情況左:換個角度看樣本,還需要繼續(xù)再透嗎?
情況中:已經(jīng)走完全部流程,樣本透明程度難以界定。
情況右:透好后樣本形態(tài)不全,透好的樣本到底該是怎樣的?
提供透明化實驗方法的文獻僅僅是提供圖示參考,并未有專門介紹如何判斷透明化樣本狀態(tài)的方法或工具,因此樣本經(jīng)過透明化處理后,很難對其透明化程度進行準確判斷,甚至需要成像完成后再反過來推測是否透明化存在問題。因此如果不借助合適的輔助工具,新手實驗者在缺乏經(jīng)驗情況下,不僅難于判斷樣本透明化程度,更難去依據(jù)樣本狀態(tài)去優(yōu)化實驗條件,即使是經(jīng)驗豐富的實驗人員,也很難做到即快速又準確。
锘海新研發(fā)的組織透明化底透臺(貨號:NH210901,圖1)是基于透明化方法研發(fā)中,為實現(xiàn)快速、簡便、準確判斷樣本透明化程度(圖2),可為樣本透明化過程提供客觀且美觀的存檔記錄的需求出發(fā)(圖3),潛心優(yōu)化設計的一款用于判斷樣本透明化程度的底透臺。該底透臺可產(chǎn)生強度均勻的背光,為樣本提供均勻一致的光照;光照強度可調(diào),可適用于不同亮度工作環(huán)境;A4尺寸面板,可覆蓋各種透明化樣本尺寸;左側(cè)大面積為帶有刻度的方格,可方便準確判斷樣本大?。挥覀?cè)小面積留白,可為樣本內(nèi)氣泡定位、樣本修塊等提供全白背光輔助。



圖1. 锘海組織透明化底透臺

圖2. 以小鼠腦為例透明化過程在底透臺上的記錄


圖3. 樣本透明化前后使用底透臺對比效果
*注:以上透明化圖片版權(quán)歸锘海生命科學所有,圖片盜用將追究責任。